過(guò)氧化氫測(cè)試盒操作簡(jiǎn)便、靈敏度高

　　過(guò)氧化氫測(cè)試盒是一種廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)及化學(xué)研究領(lǐng)域的工具，主要用于檢測(cè)生物樣本中過(guò)氧化氫的濃度。其工作原理基于特定的化學(xué)反應(yīng)與光學(xué)檢測(cè)技術(shù)的結(jié)合，具有操作簡(jiǎn)便、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。
 

　　1.比色法：較常用原理,HO在過(guò)氧化物酶催化下，氧化顯色底物生成有色化合物，產(chǎn)物吸光度(450nm/530nm等)與HO濃度成正比，特異性高、靈敏度強(qiáng)，是科研優(yōu)選方法。HO與相酸銨反應(yīng)生成穩(wěn)定的黃色絡(luò)合物且在405nm處有大吸收，黃色絡(luò)合物的顏色深淺與HO的濃度在一定范圍內(nèi)具有線性關(guān)系。故可以通過(guò)比色計(jì)算出HO的含量。
 

　　2.化學(xué)氧化還原法：HO與亞鐵離子(如硫酸亞鐵)發(fā)生芬頓反應(yīng),生成的高價(jià)鐵離子與顯色劑結(jié)合形成有色復(fù)合物;或通過(guò)HO氧化碘化鉀生成碘單質(zhì),碘單質(zhì)與淀粉結(jié)合顯色,成本低,但易受樣本中其他還原劑干擾。
 

　　3.熒光法：有的試劑盒采用的原理是HO與熒光探針?lè)磻?yīng)生成熒光產(chǎn)物，通過(guò)熒光分光光度計(jì)檢測(cè)熒光強(qiáng)度定量，檢出限更低，適合微量HO檢測(cè)。熒光產(chǎn)物的生成不受pH影響，因此，該試劑盒優(yōu)于需要在低pH溶液中測(cè)定過(guò)氧化氫的其他熒光試劑盒，后者的探針靈敏度降低。
 

　　4.POD比色法：過(guò)氧化物酶(POD)催化HO氧化顯色底物生成有色化合物，產(chǎn)物吸光度與HO濃度成正比。
 

　　過(guò)氧化氫測(cè)試盒的使用注意事項(xiàng)：
 

　　-佩戴手套、護(hù)目鏡和實(shí)驗(yàn)服，避免HO接觸皮膚或眼睛。
 

　　-在通風(fēng)良好環(huán)境中操作，防止吸入蒸氣。
 

　　-實(shí)驗(yàn)室溫度控制在18-25℃，濕度40-60，避免陽(yáng)光直射干擾熒光檢測(cè)結(jié)果。
 

　　-反應(yīng)體系需嚴(yán)格控溫，并注意pH值對(duì)HO活性的影響。
 

　　-移液器需校準(zhǔn)，避免氣泡產(chǎn)生；不同樣品使用專用器具，防止交叉污染。
 

　　-含HO的廢液需按實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)程處理，不可隨意傾倒。
 

　　-即用型試劑使用前平衡至室溫，避光保存；需稀釋的試劑應(yīng)準(zhǔn)確配比。
 

　　-過(guò)期或配置超時(shí)的試劑禁止使用。
 

　　-設(shè)置空白對(duì)照和標(biāo)準(zhǔn)曲線，每組樣本建議重復(fù)測(cè)定以提高數(shù)據(jù)可靠性。